单抗是抗细小的吗?
单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)是指用单一细胞克隆产生的抗体。1975年由美国杜克大学的科恩(Cohn)等人在《科学》杂志上发表文章介绍。这种抗体一般经过纯化,可以大量、高效地与抗原结合,且特异性强;但是它的免疫原性低。目前常用的单克隆抗体主要有两部分来源:一是从杂交瘤细胞株产生,二是利用转基因技术将抗体的基因导入动物细胞后繁殖而成。 单克隆抗体是由B淋巴细胞或骨髓瘤细胞通过融合而得到的。
由于来源于不同的细胞类型,它们的染色体数和核型都不相同,在融合之前,这两个细胞都必须经过染色体的复制。每次融合都生成两个单体细胞,每个单体细胞只含有一条染色体,这样,单克隆抗体的每一条重链或轻链都有两条或多条,而且总是由两条轻重链组成的二聚体。例如,小鼠抗人的IgM抗体有四种,即两种轻链和两种重链的免疫球蛋白。
根据所识别的抗原决定簇不同,单克隆抗体可分为同种异型抗体、同种同型抗体及抗体。 1.同种异型抗体(allogeneic antibody)能识别正常人血清中不存在的微小的自身抗原决定簇,如补本中的抗体可识别细胞表面抗原决定簇,称为细胞表面的同种异型抗体。例如,抗甲状腺球蛋白抗体是自身抗体,可检出慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者的血清中含有该抗体。
2.同种同型抗体(idiotypic antibody)能识别同一物种不同个体之间特定的蛋白质(多肽)抗原决定簇。
3.型抗体(isotypic antibody)是能识别不同物种间共有的完全相同的抗原决定簇。这种类型的抗体较少见。 目前应用的单克隆抗体多为人工合成或以基因工程形式表达的各种多肽,也有少数采用天然分子。作为制剂给病人使用时,必须进行适当处理,以消除对机体的不良影响并达到预期效果。主要处理方法如下:
①封闭:即用与抗体没有亲和力的物质封闭载玻片等的表面,防止抗体与其结合。
②中和:用能与抗体互相作用的物质来破坏其作用力,使抗体失效。
③隔离:使用一种能阻止抗体与抗原相结合的物质,称为抗体阻断剂,将其预先加入待测样品中,再检测时不致发生反应。
④抑制:在一定条件下,若外加一种化学物质能显著降低抗体与抗原结合的能力,则可认为该药物具有抑制作用。可用于判断抑制剂的存在以及抑制程度。
除了直接测定方法之外,还有间接测定法,包括放射免疫分析法和酶联免疫吸附试验等方法。
放射免疫分析法是将标记的抗原或抗体与未标记的相同抗体或抗原进行混合,如果两者存在,则形成复合物,经分离后,根据是否存在于复合物中的放射性氨基酸或糖类分子来确定被检标本中是否含有相应抗原或抗体。
酶联免疫吸附试验是在酶标抗体与抗原结合位点的基础上建立起来的一种检测方法。首先用酶标抗体试剂包被微孔板,然后加入标本溶液,经孵育后,吸出液相部分,加入底物溶液显色,根据各标本颜色深度的不同来判断其相应的含量。这种方法简便易行,适合于大批量标本的初筛。